Pepsine is een enzym, actief in de maag, dat wordt gebruikt om eiwitten te splitsen van grote componenten tot polypeptiden. Samen met zoutzuur is pepsine de hoofdcomponent van humaan maagzuur, evenals het geval is bij veel diersoorten; het was dan ook het eerst ontdekte dierlijke enzym.

Pepsinogeen wordt gemaakt in de cellen van de maagwand, samen met zoutzuur en andere componenten. In een zure omgeving wordt dit pro-enzym omgezet in pepsine.

Naast pepsine zijn er andere proteases in de maag, namelijk trypsine en chymotrypsine; elk is gespecialiseerd in het breken van bepaalde bindingen. Pepsine breekt het best bindingen tussen hydrofobe en aromatische aminozuren, namelijk phenylalanine, tryptofaan en tyrosine.

In dit experiment wordt het pH‐optimum van pepsine bepaald met behulp van pepsine afkomstig uit varkensmaag. Als substraat wordt het bloed-eiwit hemoglobine gebruikt.

Overzicht experiment

Niveau/jaarlaag 5 havo, 5 vwo
Tijd 100 min
Aantal lessen 2 lesuren
Groepsvorming twee- tot viertallen
Type practicum Onderzoekspracticum
EOES Voorronde 23-24
Eindproduct Formatieve vragen
Leerdoelen
  • De leerling kan een werkplan opstellen
  • De leerling kan nauwkeurig pipeteren
  • De leerling kan met een centrifuge werken
  • De leerling kan pH-optimum bepalen.
Vooraf klaar zetten
Per groepje:

  • 12 mL elk van vijf 2% hemoglobine‐bufferoplossingen
  • 15 mL pepsine‐oplossing
  • 1,5 mL Folin‐Ciocalteusreagens;
  • demiwater;
  • 150 mL 0,3 M trichloorazijnzuur (TCA)
  • 30 mL 0,5 M natronloog (NaOH);
  • 12 plastic centrifugebuizen van 50 mL
  • 12 glazen reageerbuizen van 40 mL
  • plastic pasteurpipetten van 1 en 3 mL met schaalverdeling;
  • een micropipet van 5000 µL (‘p5000’) en van 100 µL (‘p100’);
  • een vortex;
  • een stopwatch;
  • een waterbad op 25 °C;
  • reageerbuishouders voor in het waterbad;
  • een centrifuge
  • een spectrofotometer
  • 13 wegwerpcuvetten;
  • een fineliner / dunne stift;
  • twee vellen grafiekpapier;
  • schrijfgerei: potlood, pen, rekenmachine, geodriehoek;

Geïnteresseerd in dit experiment? Download dan het volledige lesmateriaal voor handige uitleg en kant-en-klare werkbladen om direct in de klas te gebruiken.

Meer

 

Om deze materialen te kunnen downloaden moet je een docent of TOA zijn en een docentenaccount hebben of aanmaken.

Inloggen

 
Schrijf je in voor de nieuwsbrief

Blijf op de hoogte van ons actuele aanbod aan gratis lesmaterialen en activiteiten.

Aanmelden