pH-optimum van pepsine

In dit biologiepracticum bepalen leerlingen het pH‐optimum van pepsine met behulp van pepsine afkomstig uit varkensmaag. Als substraat wordt het bloedeiwit hemoglobine gebruikt.

Pepsine is een enzym, actief in de maag, dat wordt gebruikt om eiwitten te splitsen van grote componenten tot polypeptiden. Samen met zoutzuur is pepsine de hoofdcomponent van humaan maagzuur, evenals het geval is bij veel diersoorten; het was dan ook het eerst ontdekte dierlijke enzym.

Dit practicum was onderdeel van de voorronde van de EOES in 2022-2023. Bekijk meer informatie over de EOES.

Dit practicum is ontwikkeld door in opdracht van

Overzicht practicum

Leerdoelen

• De leerling kan een werkplan opstellen
• De leerling kan nauwkeurig pipeteren
• De leerling kan met een centrifuge werken
• De leerling kan een pH-optimum bepalen

Benodigdheden per groepje

• 12 mL elk van vijf 2% hemoglobine‐bufferoplossingen (pH 1, 2, 3, 4, en 5)
• 15 mL pepsine‐oplossing
• 1,5 mL Folin‐Ciocalteusreagens
• demiwater
• 150 mL 0,3 M trichloorazijnzuur (TCA)
• 30 mL 0,5 M natronloog (NaOH)
• 12 plastic centrifugebuizen van 50 mL
• 12 glazen reageerbuizen van 40 mL
• plastic pasteurpipetten van 1 en 3 mL met schaalverdeling
• een micropipet van 5000 µL (‘p5000’) en van 100 µL (‘p100’)
• een vortex
• een stopwatch
• een waterbad op 25 °C
• reageerbuishouders voor in het waterbad
• een centrifuge
• een spectrofotometer
• 13 wegwerpcuvetten
• een fineliner / dunne stift
• twee vellen grafiekpapier
• schrijfgerei: potlood, pen, rekenmachine, geodriehoek

Veiligheidsmaatregelen

• Dit practicum moet worden uitgevoerd in een geschikte practicumruimte onder toezicht van een docent of TOA.
• Er moet een labjas en veiligheidsbril worden gedragen. Sieraden moeten uit worden gedaan en lange haren moeten in een staart.

Handleiding en werkbladen

Download met de knoppen de uitgebreide docentenhandleiding en de werkbladen voor leerlingen. De docentenhandleiding is alleen te downloaden wanneer er is ingelogd.